NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在血液中應(yīng)用中的應(yīng)用和表現(xiàn)
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)能夠在不使用機械力、蛋白酶K、氯仿/無水乙醇的條件下,通過破壞細胞壁和/或細胞膜結(jié)構(gòu)釋放細胞內(nèi)物質(zhì),進一步破壞細胞核膜結(jié)構(gòu),從而達到從全血或抗凝血中釋放核酸DNA的目的。整個步驟如下圖:
使用NuSmart®核酸直接釋放技術(shù),只需要10μL甚至更少的抗凝血就能夠釋放出全部的基因組DNA。而抗凝血中釋放的抑制物從不同程度降低PCR的靈敏度和準(zhǔn)確性。不同的抗凝劑成分對PCR擴增也有強抑制,為了解決這一問題,NuSmart®血液PCR試劑盒添加有納米物質(zhì)吸附抑制物,以幫助下游PCR、qPCR、LAMP、RPA、STR等順利完成。
當(dāng)檢測量逐年遞增,實驗室常用的提取方法不足以滿足臨床篩選需要,NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)應(yīng)運而生,能夠解決低樣本量,高檢測通量的問題。而且整個過程不使用蛋白酶K,不使用有毒有害有機試劑,無需配備高額設(shè)備即可完成。
—對樣本量要求低
—操作簡單快速
—室溫可處理
—不用液氮研磨
—不用離心
—不使用蛋白酶和有機試劑
案例 經(jīng)過處理的小鼠EDTA血和枸櫞酸鈉血擴增10對引物
1:小鼠EDTA血 2 小鼠枸櫞酸鈉血 +:柱提基因組陽性對照 -:陰性對照
使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒(貨號Nu-B01)處理小鼠EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血,使用2×Master TaqMix(With Dye)擴增分別擴增10對引物。
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