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一、iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務(wù)簡介：

iTRAQ (Isobaric Tag for Relative and Absolute Quantitation) 和 TMT(Tandem Mass Tag) 分別是由AB SCIEX和Thermo Scientific公司分別開發(fā)的、對trypsin酶解肽段進行標(biāo)記的試劑盒。標(biāo)記肽段通過LC-MS，能同時實現(xiàn)對蛋白質(zhì)的鑒定和對蛋白質(zhì)的相對定量分析。

iTRAQ和TMT的技術(shù)原理*一樣，區(qū)別在于：（1）生產(chǎn)商不同；（2）分子結(jié)構(gòu)稍有差異；（3）標(biāo)記通量有差異。iTRAQ有4標(biāo)（4-plex）和8標(biāo)（8-plex）2種規(guī)格，TMT有2標(biāo)（2-plex）、6標(biāo)（6-plex）和10標(biāo)（10-plex）等3種規(guī)格。iTRAQ/TMT標(biāo)記通量多樣，為實驗設(shè)計提供了更多的選擇性，有利于用戶根據(jù)自己的樣品數(shù)量，選擇合適的標(biāo)記方案。

iTRAQ/TMT技術(shù)的優(yōu)勢是能同時分析8-10組樣品，實驗周期短。但其不足體現(xiàn)在實驗步驟多，系統(tǒng)誤差較大。

整體服務(wù)方案：

客戶只需提供樣本即可。我方負責(zé)完成后續(xù)所有實驗，包括：

蛋白質(zhì)提取與trypsin酶解。

酶解肽段iTRAQ/TMT標(biāo)記與混合。

混合肽段HPLC分離，收集餾分。

對每個餾分進行LC-MS測試。

MS數(shù)據(jù)定性及定量分析，篩選差異表達的蛋白質(zhì)。

差異表達蛋白常規(guī)生物信息學(xué)分析。

我方該服務(wù)的優(yōu)勢體現(xiàn)在：（1）樣品通常分為15個餾分；（2）每個流程LC-MS測試時間為2h，共計測試15×2=30h。餾分和測試時間的增加，能顯著提高蛋白質(zhì)鑒定數(shù)目和蛋白質(zhì)定量的準(zhǔn)確度。